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SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱于多管發(fā)酵法的使用要點(diǎn)

更新時間:2017-09-11      點(diǎn)擊次數(shù):3466
  SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱具有計時器功能,培養(yǎng)箱適用于在廣闊溫度范圍內(nèi)的復(fù)雜用途,也可以在交叉溫度的場合,是采用內(nèi)腔預(yù)熱技術(shù)應(yīng)用在廣闊溫度范圍內(nèi)的復(fù)雜用途和交替溫度的場合。
  發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,并在內(nèi)倒置有小玻璃管。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,細(xì)菌產(chǎn)酸后,培養(yǎng)液即由原來的紫色變成黃色。產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗陽性,如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯,可輕拍發(fā)酵管,有小氣泡升起為陽性。
  1.培養(yǎng)溫度的要求
  總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的zui合適溫度為25℃左右,如在37℃培養(yǎng)則仍可生長,但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,則不再生長,而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌,習(xí)慣于37℃左右生長,如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因此,可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分。將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱時,SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱內(nèi)溫度一定要達(dá)到所要求的溫度時,方可放入。如用恒溫水浴箱時,其水面要高于接種物面,放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。
  2.加氯水樣的處理
  經(jīng)氯處理消毒過的水樣,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),在采集水樣時應(yīng)提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,硫代硫酸鈉可以脫氯,使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù),從而避免出現(xiàn)計數(shù)結(jié)果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細(xì)菌其抑制作用尤為明顯,所以抽濾時應(yīng)對水樣進(jìn)行大量無菌水稀釋,以減少余氯的殘留。
  3.樣品的保存
  采樣用的容器使用前應(yīng)蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測室接到水樣后,應(yīng)立即檢測,如因故不能檢測時,應(yīng)立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時內(nèi)檢測。
  4.SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)物質(zhì)的制備與保存
  ①多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應(yīng)將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min,然后貯存于冰箱或暗處備用。
  ②濾膜法所采用的培養(yǎng)基多使用外購的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,因此,無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色,來鑒定其穩(wěn)定性。
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